J immunol：明矾疫苗中DNA酶的作用机制研究

　　2016年7月6日讯 不溶性铝盐（明矾）被用于制作疫苗佐剂已有80多年的历史，然而，明矾本身引发免疫保护效应的机制仍然不清楚。此前研究发现，小鼠肌肉注射明矾之后，明矾颗粒能够被染色质吸附，因而，接种部位释放的染色质可能参与了明矾引发的免疫反应。另外，一些研究也表明与明矾结合的DNA能够引发宿主的炎性反应，从而介导CD4 T细胞的激活以及抗体的产生。然而，CD8 T细胞的激活却没有明显影响。

　　为了探究明矾佐剂对CD4 T细胞以及CD8 T细胞的不同影响，来自科罗拉多大学的Philippa Marrack课题组进行了深入研究，相关结果发表在最近一期的《Journal of Immunology》杂志上。

　　首先，作者为了验证此前的研究，利用明矾与OVA-NP 抗原对小鼠进行肌肉接种。结果显示：在有DNA酶的情况下，OVA-NP与明矾的联合刺激引发的CD4 T细胞反应降低了将近4倍，然而CD8 T细胞的反应却没有明显影响。

　　为了拓展上述研究，作者将疫苗中的明矾用LPS代替，令人惊奇的是：LPS与OVA-NP刺激引发的CD4 T细胞反应同样会受到DNA酶的影响，由于LPS已知并不会与宿主的DNA发生反应，因此，作者认为疫苗中的DNA酶应该以某种意想不到的方式发挥着免疫调节作用。

　　另外，作者也发现如果用完整的NP代替OVA-NP作为疫苗中的抗原成分的话，其产生的免疫反应就不会受到DNA酶的影响。

　　进一步，逝通过生化的手段，发现在购买的商品化DNA酶中存在一定量的蛋白酶杂质。这部分蛋白酶能够一定程度上抑制DNA酶的活性。作者通过使用苯甲磺酰氟（PMSF）抑制DNA酶中这部分蛋白酶的活性，之后在制备疫苗佐剂对小鼠接种，结果显示，这一处理能够部分恢复DNA酶对CD4 T细胞的抑制作用。这一结果说明DNA酶中的蛋白酶组分参与抑制了由抗原引发的CD4 T细胞激活反应。

　　然而，当蛋白酶的效应被排除之后，作者仍然会看到DNA酶抑制CD4 T细胞激活的现象，通过酶活抑制试验，作者证明上述抑制效应不依赖于其DNA酶的活性。

　　STING蛋白是胞内识别胞浆中DNA的元件，也是明矾刺激的下游信号分子。通过比较野生型小鼠与STING突变体小鼠对明矾疫苗接种后的反应，作者发现突变体小鼠在DNA酶是否存在的情况下都会产生相当的CD4效应T细胞。以上结果表明STING参与了DNA酶引发的免疫抑制效应。

　　作者的研究到此已经结束，对于其中的具体机制还需要更进一步的研究。