非编码RNA的最新研究成果

　　2016年08月31日讯 非编码RNA包括小RNA（small RNA）和长非编码RNA（long non-coding RNA， lncRNA），最近的几项研究揭示了不同类型的ncRNA在提高肿瘤免疫疗法效率，促进关节软骨损伤修复，预测肝细胞癌，调节Th17活性机制，调节乳腺癌化疗敏感性，和治疗恶性卵巢癌中的调控作用。下面具体介绍这些研究。

　　miRNA调节Th17活性机制

　　清华大学免疫系的董晨教授课题组对miRNA调节Th17活性机制进行了深入研究，相关结果发表在近期的《Immunity》杂志上。

　　一些研究表明，Dicer1的缺失能够降低Th17细胞分泌IL-17A的水平，另外，miR-155？与miR-326也能够促进Th17细胞的分化及其在EAE模型中的作用。然而，miRNA在调节Th17细胞分化中的影响至今仍没有得到很好的解释。

　　针对上述问题，首先作者构建了CD4 T细胞特异性Dicer缺失突变体小鼠。通过体外进行Th17特异性诱导，作者发现突变体小鼠CD4 T细胞相对于野生型细胞IL-17A与IL-17F有明显的下调。通过RT-PCR的手段，作者发现在Dicer缺失的情况下IL-17A与IL17F的mRNA水平也有明显下降。之后，作者构建了IL-17F+特异性Dicer缺失突变体小鼠，并融合了黄色荧光蛋白作为筛选标记。通过EAE诱导，作者发现这类突变体小鼠相比对照组小鼠中枢神经系统中Th17的水平有明显的下降，而且突变体小鼠几乎可以免受EVE的疾病困扰。

　　为了鉴定在Th17分化过程中miRNA的作用，作者比较了不同类型的T细胞中miRNA的表达特征。通过RNA测序，作者发现Th17细胞中高表达miR-183C，而这一miRNA的表达依赖于IL6-STAT3的信号传递。

　　进一步，作者发现miR-183C的存在能够大幅提高Th17的生物活性，而人为地下调miR-183C的水平则会降低其生物学活性。

　　之后，作者发现miR-183C能够负向调节Th17细胞中FoxO转录因子的表达水平，这一调节作用能够导致Th17细胞生物学活性的上升。

　　miRNA调节乳腺癌化疗敏感性

　　miRNA-205是一类肿瘤抑制因子，乳腺癌中过表达miRNA205能够有效抑制细胞的复制并促进其凋亡。为了研究miRNA205对于乳腺癌发生的意义以及能否作为预测乳腺癌对化疗敏感性的生物标志物，来自天津医科大学肿瘤医院的张瑾课题组进行了深入研究，相关结果发表在最近一期的《Cell death and disease》杂志上。

　　新辅助化学疗法（Neoadjuvant chemotherapy，NAC）是目前影响肿瘤手术成功率的关键因素。另外，NAC也能够影响肿瘤细胞对化学疗法的敏感性。一般情况下，仅有少部分乳腺癌患者对于NAC有反应，不幸的是，目前没有精确预测反应患者群体的有效方法，另外，目前急需解决过度的化疗给患者带来的严重负效应。一些研究试图寻找能够预测NAC反应性的生物标记，从而降低化疗带来的的副作用以及致死风险，这对于乳腺癌的治疗具有重要的意义。

　　文章中，作者首先比较了对NAC处理反应各异的乳腺癌患者体内的癌细胞中miRNA205的表达水平。结果显示：miRNA205的表达量与癌细胞对NAC的敏感度之间存在明显的正向相关性。这意味着，miRNA205的表达量越高，则患者对化疗的敏感程度也就越高。

　　之后，作者人为地了提高了耐药性乳腺癌细胞MCF-7/A02 与CALDOX中miRNA205的表达量，发现这处理能够使得这些细胞对于化疗药物的敏感度增加。

　　进一步，作者发现过表达miRNA205能够促进细胞的凋亡，尤其是提高caspase的活性以及调节其它与细胞凋亡信号通路相关的蛋白质的活性。此外，miRNA205还能够负向调节VEGFA与FGF2的表达量。这一作用对于提高乳腺癌细胞的敏感性具有关键的作用。

　　接下来，作者将癌细胞培养中加入VEGFA/FGF2，在此基础上再进行药物刺激。结果显示，这一处理能够大幅提高乳腺癌细胞对化疗药物的耐药性。

　　最后，作者通过小鼠试验证明了miRNA205在提高乳腺癌细胞对化疗药物敏感性方面的作用。

　　microRNAs分子治疗恶性卵巢癌显神效

　　长期以来，小型非编码的microRNAs分子都被认为在癌症发生过程中扮演重要角色，最近来自德克萨斯大学MD安德森癌症中心的研究人员通过研究阐明了microRNAs在癌症基因表达中的重要角色，相关研究刊登于国际杂志Cell Reports上。

　　文章中，研究者Mills表示，microRNAs分子似乎可以通过多个不同的靶点来调节细胞功能，而其被认为主要通过下调信使RNA的功能水平来发挥作用；值得注意的是，本文研究表明，microRNAs分子实际上可以直接上调癌症基因的表达，这无疑就扩大了我们对microRNAs分子调节细胞功能以及机制的相关认识。

　　STAT3是一种和卵巢癌患者预后较差相关的转录因子，文章中研究人员利用癌症基因组图谱（Cancer Genome Atlas）计划中的数据，主要对转录因子STAT3和miR551b分子（一种microRNAs分子）之间的相互影响进行了相关研究，目前很少有研究揭示microRNAs分子如何影响STAT3的蛋白水平，以及最终引发体外和体内实验中细胞死亡耐受性及癌细胞增殖能力增加的现象；研究者认为miR551b分子或许是一种潜在的生物标志物和治疗靶点。

　　本文研究也支持了此前的一种看法，即miR551b的表达可以阻断STAT3的活性，从而有效治疗卵巢癌；研究者也认为这项研究可以帮助进行抗miR疗法的后期评估。为了深入探究miR551b作为治疗靶点的潜力，研究小组利用抗miR551b疗法来治疗小鼠，两周一次，持续治疗一个月，随后研究者发现小鼠机体的肿瘤明显被抑制了。

　　最后研究者Mills说道，我们的研究结果揭示了抗miR551b疗法在治疗高水平miR551b的卵巢癌中的治疗潜力，后期研究人员还将深入研究来检测抗miR551b疗法结合其它治疗手段所产生的治疗效果。