Cell Rep：IKKe调控T细胞NFAT激活的分子机制

　　2016年7月13日讯 NFAT（Nuclear Factors of activated T cells）最初被发现是T细胞激活的关键调节因子。NFAT家族蛋白包含5个转录因子（NFATc1-NFATc4以及NFAT5）。它们拥有相似的结构域以及结构特征。NFAT蛋白包括一个N端的反式激活结构域，一个调节结构域，一个DNA结合结构域以及一个C-端的反式激活结构域。调节结构域中含有多个丝氨酸/苏氨酸基序，能够被多种激酶磷酸化。在未激活的情况下，NFAT被激酶磷酸化后能够阻止其进入细胞核中，一旦T细胞被激活，钙信号的流入能够激活更多钙依赖的激酶，从而促进NFAT的入核与转录调控。

　　NFAT不仅对于T细胞的激活十分重要，而且参与了其它很多过程，包括干细胞的分化以及肿瘤的恶化等等。因此，了解NFAT转录因子的精细调控过程是十分重要的方向。

　　IKKe是一类诱导型的IKK，最初发现其参与了病毒感染引发的干扰素释放的过程。此外，IKKe还被认为是一类原癌基因，它参与了多种癌症的发生与恶化。更重要的是，IKKe参与了T细胞介导的NF-kB的激活。

　　为了研究Ikke在T细胞激活后介导NFAT转录调控的分子机制，来自南加州大学的Pinghui Feng课题组进行了深入研究，相关结果发表在最近一期的《cell reports》杂志上。

　　首先，作者研究了IKKe在DNA病毒感染过程中的作用。他们利用疱疹病毒感染小鼠，并分析了病毒的复制情况。结果显示：IKKe缺失突变的小鼠中病毒的复制能力受到了明显的抑制。

　　之后，作者发现IKKe缺失突变体小鼠在病毒感染后体内病毒特异性CD8 T细胞的数量相比野生型有明显的提高。这说明IKKe对于CD8 T细胞的激活具有一定的负向调节作用。为了证明这一观点，作者利用shRNA的技术敲低了Jurkat细胞中IKKe的水平，并检测了IL-2等基因的表达情况。结果显示：IKKe表达量的下调确实能够抑制T细胞的活性。

　　进一步，作者利用NFAT报告系统检测了IKKe在NFAT激活信号通路中的作用。随着IKKe表达水平的提高，作者发现NFAT的活性开始下降，这说明IKKe能够抑制NFAT的活化。具体地，IKKe能够直接或间接地造成NFATc1蛋白的磷酸化，而失去催化活性的IKKe则没有活化NFATc1的能力。

　　接下来，作者通过体外实验证明了IKKe的激酶活性与T细胞的活化之间具有明显的反向相关性。而IKKe活性的抑制能够提高抗肿瘤T细胞的活性，进而降低肿瘤的严重程度。

　　最后，作者通过体内试验证明，在持续感染病毒或患有肿瘤的小鼠体内，CD8 T细胞内的IKKe得到了激活，这也许是上述疾病难以通过免疫疗法治愈的原因之一。