关于人类外泌体的最新研究进展

　　2016年10月23日讯 瘤内微环境或基质（stroma），对胰腺导管腺癌（PDA）病理学十分重要，特定条件的基质可能促进癌症侵略性的增强。作者假设这个异质性和演变的环境能够彻底影响肿瘤细胞能力，反过来通过EV介导的交流（crosstalk）影响PDA侵略性。

　　1、肿瘤相关成纤维细胞来源annexin A6+胞外囊泡促进胰腺癌的侵略性

　　瘤内微环境或基质（stroma），对胰腺导管腺癌（PDA）病理学十分重要，特定条件的基质可能促进癌症侵略性的增强。作者假设这个异质性和演变的环境能够彻底影响肿瘤细胞能力，反过来通过EV介导的交流（crosstalk）影响PDA侵略性。在文章中，作者分析了PDA基因组基质特征，发现annexin A6/LDL receptor-related protein 1/thrombospondin 1 （ANXA6/LRP1/TSP1）复合物对肿瘤细胞交流的促进作用。ANXA6/LRP1/TSP1复合物形成受限于肿瘤相关成纤维细胞（CAF）和提高肿瘤或细胞存活率和迁移所需的病理生理培养条件。PDA侵略性的增加依赖于肿瘤细胞介导的对CAF来源ANXA6+ EV（携带着ANXA6/LRP1/TSP1复合物）的吸收。去除CAF的ANXA6，会阻碍复合物的形成，继而减少PDA和转移的发生，注射CAF来源ANXA6+ EV能促进肿瘤发生。作者发现PDA病人的血清中存在ANXA6+ EV，即它是PDA级别的一个潜在生物标志物。以上发现，表明ANXA6+ EV支持的CAF肿瘤细胞交流能够预测PDA的侵略性，且它能作为PDA的治疗靶点和潜在标志物。

　　永诺看法

　　咱们一起来看看作者提出的这个机制：

　　微环境出现压力（例如缺氧或营养不良）后，CAF和巨噬细胞修改它们的关系，导致CAF的能力发生巨大的变化。具体的说，它们分泌ANXA6+ EV，携带ANXA6/LRP1/TSP1复合物，这是邻近胰腺肿瘤细胞吸收EV所必需的。吸收ANXA6+ EV后，肿瘤细胞侵略性和转移潜能增强。

　　2、心肌球来源细胞分泌的exo能减少疤痕形成，减弱不良心肌重构，提高急性和慢性心肌梗塞的功能

　　目的：自然分泌的纳米囊泡，也就是我们说的exo，是心肌球来源细胞（cardiosphere-derived cell, CDC）再生所需的，且exo在啮齿动物中能模拟CDC的作用。然而，科学家们还没在转化应用的大动物模型中研究过exo。作者旨在优化CDC来源exo在急性（AMI）、恢复的（CMI）心肌梗塞猪模型中的递送，且评估其效果。

　　方法与结果：在AMI中，猪在再灌注30min后，通过冠状动脉内（IC）或开胸心肌内（IM）递送接受人CDC exo或空白载体。48h进行组织结构检测无回流区和梗塞面积（IS）。IC exo没有效果，但是IM exo将IS从80 ± 5%减少至61 ± 12%（ P= 0.001），而左心室射血分数（LVEF）不变。在CMI的随机安慰剂对照实验中，在心肌梗塞（MI）4周后，猪经由皮肤IM吸收空载或CDC exo，处理前和处理后1个月的核磁共振（MRI）显示exo保住了左心室体积和LVEF（？0.1 ± 2.2% vs. ?5.4 ± 3.6%, P= 0.01），而疤痕（scar）大小减少。在组织结构方面，exo减少了左心室胶原含量和心肌肥大，同时血管密度增加。

　　结论：CDC exo IM递送减少了疤痕，终止了猪AMI和CMI中的不良心肌重构，提高了LVEF。心肌梗塞的非细胞治疗药物是一个非常吸引人的概念，exo有着自身的不足，因此IM呈递显得十分必要。

　　永诺看法

　　诚如作者所说，在大型动物中研究exo体内功能的报道十分罕见，这就是这篇文章的可贵之处。

　　3、外泌体分泌是清除病理性TDP-43的重要途径

　　细胞质TDP-43累积是肌萎缩性脊髓侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis）和额颞叶变性（frontotemporal lobar degeneration）的病理标志。在这篇文章中，研究者探索了exo对TDP-43分泌和传播的作用。在Neuro2a细胞和初级神经元脑细胞分泌的exo中能检测到TDP-43，但是星形胶质细胞和小胶质细胞分泌的exo中没有。证据表明蛋白积累和自噬抑制是促进exo分泌TDP-43的因素。研究者在文中还报道说exo TDP-43全长水平和C端片段水平在人肌萎缩性脊髓侧索硬化的大脑中上调。对Neuro2a细胞添加肌萎缩性脊髓侧索硬化大脑分泌的exo，TDP-43会在细胞质重新分布，表明分泌的exo可能有助于TDP-43蛋白病的传播。但是，用GW4869或沉默RAB27A，使中性鞘磷脂酶2失活，抑制exo分泌，激起了TDP-43聚合物在Neuro2a细胞的形成。此外，GW4869处理加剧了表达人TDP-43 A315T 突变体的转基因小鼠的疾病表型。因此，即使结果表明含有病理性TDP-43的exo可能对TDP-43蛋白病的传播起着重要的作用，基于抑制exo产量的肌萎缩性脊髓侧索硬化症治疗手段貌似并不适合，因为体内实验数据表明exo分泌对病理TDP-43的神经元清除有着整体的促进作用。

　　永诺看法

　　作者很诚实指出exo用于真正转化治疗的矛盾：就算是针对同一疾病，exo的存在即对A通路机制有抑制作用，又对B通路机制有促进作用，那要怎么利用exo呢？这个问题值得我们思考。