Nature Biotechnol：基因治疗应用CRISPR/Cas9治疗肝脏疾病

　　2016年2月26日讯 在过去35年基因治疗发展进程中，James Wilson是其中一位开拓者，近期他把病毒载体和最新CRISPR/ Cas9技术结合，来应对罕见的遗传性肝病。他主要是针对啮齿类动物进行实验研究，该工作虽然给我们提供了新技术的希望，但也存在意想不到的障碍。

　　宾夕法尼亚州大学基因治疗研究所的教授James Wilson是腺相关病毒（AAV）载体制造之父，该载体主要应用于基因治疗。尽管早期一名病人死亡使基因治疗研究停滞达数十年，然而经过这么多年的发展，James Wilson教授的AAV载体已经被ReGenX授权，ReGenX公司对外授权不少的生物技术公司，正在开发新的基因治疗项目。

　　James Wilson教授用AAV载体将CRISPR/Cas9基因编辑工具导入一种罕见代谢尿素循环障碍的小鼠模型中，该模型病症是由鸟氨酸转氨甲酰酶（OTC）缺失导致的。当该酶系中一种酶丢失或者缺陷，氨就会积累在血液中，循环至大脑，最终严重损伤大脑。据报道每40000名出生婴儿中就有一名患有OTC的缺失。

　　Wilson团队用一个AAV载体将作为剪切工具的核酸酶Cas9特异性导入肝细胞中。另一个载体将gRNA带到特异性DNA靶位点，从而达到定点突变。这种复制粘贴模式以迅雷不及掩耳之势传遍了各大实验室。

　　研究文章发表于《Nature Biotechnology》，Wilson说他的团队能成功逆转10%的的新生小鼠肝细胞，相比于未治疗组能显著提高存活率。团队称，尽管在成年小鼠中实验结果没有达到预期效果，但他们强调过程还需要一定的修正，并且目前已经在全程跟踪新方法。

　　Wilson教授称："纠正了出生后致病突变的动物模型让我们离实现个性化药物的方向更近了一步。基因治疗的35年的职业生涯告诉我们，从小鼠研究向人类治疗转变是一项多么艰巨的任务。从此次研究中，我们通过调节基因编辑系统来解决在成年动物中不可预见的并发症问题。"