HIV抗体检测要做多久 检查需要注意什么呢

2017-01-23 15:36 来源:网友分享

一、HIV抗体检测要做多久

  1、酶联法 :即“酶联免疫法”,简称ELISA。它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤很简单:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有质控品。经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。

  严格的讲,如果第一次检测为阳性的话,无论是哪个实验室,必须按照CDC的HIV操作规程来进行第二次检测,第二次的方法必须与第一次的不同,如还是阳性,将送艾滋病确认实验室确认。

  2、快速法 :即“金标法”,又叫“胶体金法”,金标法是国际上较为先进的灵敏,特异,快速,简便,准确率高的体外诊断方法。测定结果仅凭特制的检测试纸在短时间内即可获得。金标法(艾滋病检测试纸),取血后滴在试纸上,用15分钟的时间观察该试纸有无颜色变化。

  艾滋病快速检测法可以在家里自己检测,操作简单方便,不需要特殊的仪器,在艾滋病试纸上先滴两滴血,再滴一滴稀释液,然后等待15分钟读取结果。结果判读也很简单,如果试纸上出现一条红色的直线,说明是阴性,如果是两条红线,就是阳性。如果检测出现阳性,按照HIV检测流程,需要进行复测。

  使用快速法(艾滋病试纸)进行艾滋病自我检测应该在专业人员指导下进行,以确保整个自测操作过程规范正确,结果准确可靠。

  3、蛋白免疫印迹法(WB)

  艾滋病确诊实验室常用的方法,主要用于确认试验,当初筛出现阳性时,需采用此方法进行确认实验。基本原理是HIV全病毒抗原经过SDS-PAGE电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上。将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。将待检血清样品用稀释液稀释成1/100,再把它直接加到硝酸纤维素膜上,恒温震荡,使其充分接触反应。血清中若含有抗HIV抗体,就会与膜条上的抗原带相结合。加入抗人IgG酶结合物和底物后,即可使有反应的抗原抗体结合带呈现紫褐色,根据出现条带情况判定结果。

二、孕期做HIV抗体检查需要注意什么

  1、HIV检查需要空腹吗

  HIV检查是定性试验而非定量试验,不受饮食和药物的影响,因而检测前不需要空腹、禁食。 另外,艾滋病病毒抗体的检测是特异性的,而且抗体水平不受体温、药物等的影响。因此,一般性的生病、服药不会影响艾滋病病毒抗体检测结果。

  2、HIV检查能喝水吗

  HIV检查能喝谁。HIV检查是指采用实验室方法对人体血液、其他体液、组织器官、血液衍生物等进行病毒以及抗体相关指标检测,喝水吃饭都没有影响。

  3、HIV检查多久出结果

  HIV检查分为初筛和确证两个步骤。初筛酶联免疫试验需要大约两到三个小时,如果用快速试剂进行初筛检测,则可以在半小时之内出结果。初筛试验结果阳性就需要做进一步复检和确证,确证检测的时间是一到两天。但以上仅仅是试验本身的时间,具体操作时还需考虑标本运送时间和各个试验室的工作安排,各个实验室的情况不一样,很难有统一的标准。在传统检测中,收集到的样本要送到一个中心实验室进行检测,这种方法可能会要求孕妇一周后或更长时间后回来看结果。

三、做HIV抗体检测前注意事项

  目前作为诊断手段使用的检测主要包括抗HIV病毒抗体检测、病毒培养、核酸检测和抗原检测。其中对病毒抗体的检测是最常规使用的方法,这不但是由于这类检测特异性、敏感性较高,方法相对简便、成熟,更重要的原因是HIV抗体在病毒感染后除早期短暂的”窗口期”外的整个生命期间长期稳定地存在并可被检测到。在一些特殊情况下,当抗体检测无法满足HIV感染诊断的需要时,病毒分离及测定、核酸检测、抗原检测可作为辅助手段使用,这包括对非典型血清学反应样品的诊断、HIV感染的窗口期诊断、新生儿早期诊断和对特殊样品的诊断。

  1、检测前半小时应适量饮水避免血液过于粘稠。

  2、准备好:酒精,药棉,计时器,并用用清水和肥皂洗干净双手。

  3、检测应在室温4度以上进行操作;扎针取血前应该先用酒精消毒采血部位(一般是手指),然后按摩,促使血液流通。

  4、出血后,可轻轻挤手指,将受检血液滴入加样孔,一般用3滴血。

  5、滴入血液后10秒,滴入1滴缓冲液就足够了,此时开始计时。(如果血液足够顺利到达检测C区可不加缓冲液)

  6、加样后15分钟可以观察结果,一条线为阴性,二条线为阳性,超过30分钟结果不准确。(15-30分钟结果最准确)

四、HIV-抗体检测方法的确认实验

  (一)免疫印迹实验(westernblot,WB)是广泛用于许多传染病诊断的实验方法,就HIV的病原学诊断而言,它是首选的用以确认HIV抗体的确认实验方法,WB的检测结果常常被作为鉴别其他检验方法优劣的“金标准”。

  确认试验流程:

  有HIV-1/2混合型和单一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型试剂进行检测,如果呈阴性反应,则报告HIV抗体阴性;如果呈阳性反应,则报告HIV-1抗体阳性;如果不满足阳性标准,则判为HIV抗体检测结果不确定。如果出现HIV-2型的特异性指示条带,需用HIV-2型免疫印迹试剂再做HIV-2的抗体确认试验,呈阴性反应,报告HIV-2抗体阴性;呈阳性反应则报告HIV-2抗体血清学阳性,并将样品送国家参比实验室进行核酸序列分析,

  WB的敏感性一般不低于初筛实验,但它的特异性很高,这主要是基于HIV不同抗原组分的分离以及浓缩和纯化,能够检测针对不同抗原成分的抗体,因而能够用WB方法鉴别初筛实验的准确性。从WB确认试验结果看出,初筛试验尽管选择质量较好的试剂,如第三代ELISA,仍会有假阳性出现,必须通过确认试验才能得出准确结果。

  (二)免疫荧光实验(IFA)

  IFA法经济、简便、快速,曾被FDA推荐用于WB不确定样品的诊断。但需要昂贵的荧光显微镜,需要受过良好训练的技术人员、观察和解释结果易受主观因素的影响,结果不宜长期保存,IFA不宜在一般的实验室开展和应用。

  HIV抗体确证试验结果报告

  HIV抗体确证试验结果用附表3报告。

  (1)符合HIV-1抗体阳性判断标准,报告“HIV-1抗体阳性(+)”,并按规定做好检测后咨询、保密和疫情报告工作。符合HIV-2抗体阳性判断标准,报告“HIV-2抗体阳性(+)”,并按规定做好检测后咨询、保密和疫情报告工作。

  (2)符合HIV抗体阴性判断标准,报告“HIV抗体阴性(-)”。如疑似“窗口期”感染,建议进一步做HIV核酸检测,尽早明确诊断。

  (3)符合HIV抗体不确定判断标准,报告“HIV抗体不确定(±)”,在备注中应注明等待“4周后复检”。

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