艾滋病检测中心 艾滋病的检测发展是什么

一、什么叫做艾滋病呢

自1981美国报道首例艾滋病患者以来，艾滋病在全球范围内广泛传播，严重威胁着人类的健康。尽管全世界对艾滋病的防治方法进行了大量的研究，但至今仍未获得有效的预防药物和治方法，因此对感染者从感染到艾滋病发病这一段潜伏期时间长度的研究对于了解艾滋病的然史、评价治疗效果、进行流行预测等方面都有着重要的意义。30年以来，针对监测系统的不同监测数据，对艾滋病潜伏期进行了大量的研究，提出了多种不同的方法，不同方法对艾滋病潜伏期得出了不同的数据，所得到的艾滋病潜伏期结果普遍都在8-9年。至今为止，除了极少数未被确认的个体报告之外，还没有任何可证实的资料证明有短于1年或者长达20年的艾滋病潜伏期存在。

　　艾滋病检测是指采用实验室方法对人体血液、其他体液、组织器官、血液衍生物等进行艾滋病病毒、艾滋病病毒抗体及相关免疫指标检测。现在检测HIV的方法有100多种，可以分为抗体检测和病毒检测两大类。

　　何为艾滋

　　艾滋病是一种危害性极大的传染病，由感染艾滋病病毒(HIV病毒)引起。HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒。它把人体免疫系统中最重要的T淋巴细胞作为主要攻击目标，大量破坏该细胞，使人体丧失免疫功能。因此，人体易于感染各种疾病，并可发生恶性肿瘤，病死率较高。HIV在人体内的潜伏期平均为8～9年，患艾滋病以前，可以没有任何症状地生活和工作多年。

二、艾滋病什么时候检查

　　检测时间

　　艾滋病潜伏期

　　自1981美国报道首例艾滋病患者以来，艾滋病在全球范围内广泛传播，严重威胁着人类的健康。尽管全世界对艾滋病的防治方法进行了大量的研究，但至今仍未获得有效的预防药物和治方法，因此对感染者从感染到艾滋病发病这一段潜伏期时间长度的研究对于了解艾滋病的然史、评价治疗效果、进行流行预测等方面都有着重要的意义。30年以来，针对监测系统的不同监测数据，对艾滋病潜伏期进行了大量的研究，提出了多种不同的方法，不同方法对艾滋病潜伏期得出了不同的数据，所得到的艾滋病潜伏期结果普遍都在8-9年。至今为止，除了极少数未被确认的个体报告之外，还没有任何可证实的资料证明有短于1年或者长达20年的艾滋病潜伏期存在。

　　最佳检测时间

　　艾滋病检测的最佳检测时间，对于艾滋病患者来说是一个非常重要的事项，因为患有艾滋病的人，在早期极少出现让人们感到异常的症状，所以常常被人们所忽略。一直到了发现症状的时候，艾滋病就已经到了晚期了，治疗已经极为不容易了。所以在感染早期，及时的进行艾滋病检测，是一项很重要的事项，他能帮助患者及早的发现艾滋病的症状。在高危行为后，一般需要2-4周时间就可以检测出艾滋病HⅣ抗体。

三、艾滋病的检测方式有哪些

　　检测方式

　　目前检测HⅣ的方法有100多种，总体来说可以分为抗体检测和病毒检测两大类。病毒检测包括细胞培养(病毒分离)、p24抗原检测和病毒核酸检测。早期对HⅣ的诊断主要是通过血清学试验检测抗HⅣ的抗体，间接地诊断HⅣ感染。近几年，分子生物学方法不断被应用到HⅣ的检测中，HⅣ的实验室诊断方法取得了很大的进展，核酸检测已经成为了HⅣ实验室诊断的发展方向。

　　抗体通常是在感染后3～8周能够被检测出来。目前，大多应用双抗原夹心法，这种方法具有很好的灵敏性和特异性。抗体检测由初筛和确认试验组成，初筛试验呈阳性的必须进行确认试验。酶联免疫吸附分析(ELISA)方法有一定的灵敏度，且操作简单、快速，适合对大量样品的检测。因此，是目前临床通用的初筛检测方法。国际上有3种确认试验方法，包括免疫印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验，目前以免疫印迹试验最为常用。

　　在窗口期，病毒抗体不能被检出，但可以检测到病毒相关抗原或分离病毒。抗原能够在个体感染后先于血清转化2～18d被检测到。因此，在血清转化期通过检测p24抗原有着很大的优势，可以作为早期辅助诊断HⅣ感染的一种方法。

　　抗体检测

　　主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)以及化学发光法。ELISA用去污剂裂解HⅣ或感染细胞液提取物作抗原，IFA用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测，如果发现阳性标本应重复一次。为防止假阳性，可做Westernblot(WB，蛋白印迹法)进一步确证。

　　WB法是用聚丙烯酰胺凝胶电泳将HⅣ蛋白进行分离，再经传移电泳将不同蛋白条带转移于硝酸纤维膜上，加入病人血清孵育后，用抗人球蛋白酶标抗体染色，就能测出针对不同结构蛋白抗体，如抗gp120、gp41、P24抗体，特异性较高。

　　快速检测法，也称为金标法，也是抗体检测的一种方法，根据免疫层析法的原理，用于HⅣ抗体检测的定性检测。

　　抗原检测

　　用ELISA检测P24抗原，在HⅣ感染早期尚未出现抗体时，血中就有该抗原存在.由于P24量太少，阳性率通常较低。现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原，来提高敏感性。

　　核酸检测

　　用PCR法检测HⅣ基因，具有快速、高效、敏感和特异等优点，目前该法已被应用于HⅣ感染早期诊断及艾滋病的研究中。包括DNA检测和RNA检测。

　　病毒分离

　　常用方法为共培养法，即用正常人外周血液分离单个核细胞，加PHA刺激并培养后，加入病人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中。

　　检测试纸检测

　　艾滋病检测试纸条是使用胶体金免疫层析科技研发的新一代检测试剂。它可检测血清或血浆标本中的HⅣ-1/2特有性抗体。所有操作时间共是15分钟，动作简便、迅速、准确、自带质控对照、无需所有附加药剂。适合个人检测，也适合各大医院，疾控中心检测。

四、艾滋病的检测发展

　　检测发展

　　方法进展

　　【核酸检测方法研究进展】

　　随着分子生物学技术的发展，核酸检测越来越受到人们的重视并将其与抗原抗体反应的高特异性结合起来形成了免疫PCR技术。这一技术具有特异性强和灵敏度高的特点，可用于单个抗原的检测。这促进了应用PCR技术进行HⅣ核酸检测的快速发展。自2001年起，COBAS Ampliscreen HⅣ 1 Test等4种HⅣ核酸检测技术通过了FDA的批准，作为进筛选分析技术来进行HⅣ1的检测。实时荧光PCR检测技术的应用使HⅣ核酸检测技术又进入到一个新境界。通过这种技术，不但可以进行定性检测，更重要的是可以进行定量检测。Barletta等将这一技术应用到HⅣ的检测中，大大降低了病毒载量的检测限(0.66个拷贝相当于0.33个病毒粒子)。2002年4月国家药品监督管理局(SDA)批准了第一个HⅣ荧光PCR检测试剂盒,2012年我国政府在加大HIV核酸检测的推广力度。

　　【p24抗原检测方法研究进展】

　　随着检测灵敏度不断提高， p24抗原的检测逐渐从主要用于在窗口期辅助早期诊断和进一步缩短窗口期，发展到用于病毒载量测定。目前，p24抗原在以下几方面都有重要应用：HⅣ?1抗体不确定或窗口期的辅助诊断;HⅣ?1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断;第4代HⅣ?1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性反应，但HⅣ?1抗体确认阴性者的辅助诊断;监测病程进展和抗病毒治疗效果。但现有监测病程进展和抗病毒治疗效果均采用昂贵、操作复杂的病毒RNA测定方法。中国HⅣ/AIDS患者绝大部分是在基层，检测1次病毒载量需要上千元(约1 500元)，很难在基层普及，对疾病的治疗和控制很不利。高灵敏度p24抗原检测方法的建立成为在发展中国家使用的病毒载量测定方法的一种选择。

　　近几年，国外对建立高灵敏度检测p24抗原的研究一直没有停止，如为了提高检测血清中p24抗原的敏感性，将血清中免疫复合物解离后再进行测定，发展了ICD p24抗原测定法。2003年Sutthent等将免疫复合物热解离后通过TSA信号放大系统使用ELISA进行检测，使p24抗原检测的最小检出值由原来的10 pg/mL降低到0.5 pg/mL，在HⅣ?1抗体阳性母亲所生婴儿早期的诊断中与RNA检测相当，与HⅣ核酸检测具有可比性，具有重要的实用价值。2004年，来自HⅣ病毒的发现者之一美国马里兰大学Dr.Robert C.Gallo所领导的实验室的一篇高灵敏度检测p24抗原的研究论文引起了广泛的关注，p24抗原的检测成为比病毒核酸检测更灵敏的方法。2005年来自美国马里兰大学的一篇长篇综述也开始关注p24抗原的检测，认为这可以作为低成本、适合在发展中国家使用的替代现有昂贵的RNA测定方法的一种选择。

　　目前，商品化的p24抗原的标准检测方法主要是依据夹心ELISA原理。该方法是用抗p24抗原的抗体包被固相的双抗体夹心法，是检测抗原最为常用的方法，国内尚未见商品化的HⅣ p24抗原检测试剂的生产。综上所述，用高灵敏的分析方法诊断艾滋病将有助于实现早期诊断，避免漏检，有助于对治疗艾滋病药物的疗效评价、预测和监测疾病进程，提高检测的灵敏性、缩短窗口期，是HⅣ诊断方法和诊断试剂持续发展的主要方向。

　　以上简述了HⅣ的流行概况和实验室的检测技术，相信随着HⅣ实验室检测技术的不断的改进，尤其是核酸检测技术的不断应用，HⅣ检测的窗口期将会逐步缩短，经输血传播HⅣ可能性也将会大大减小。