2017-07-22 07:51 来源:网友分享
Rh血型鉴定一般指Rh系统中D抗原的检测,根据病人红细胞是否带有D抗原,分为Rh阳性和Rh阴性。
一、蛋白水解酶法
(包括菠萝酶、木瓜酶、无花果酶、胰蛋白酶等) 以菠萝酶介质法为例:
⑴取菠萝酶1g,加pH5.5磷酸盐缓冲液100ml,充分振摇混匀,置37℃水浴箱30min,离心沉淀后取上清液即1%菠萝酶液。放置4℃冰箱贮存。
⑵待检者红细胞及对照红细胞用生理盐水洗涤1次(有溶血的红细胞除外),配成5%红细胞悬液。
⑶取小试管15支,分3排,每排试管按C、c、D、E、e顺序标记。
⑷每排第1管加抗C血清,第2管加抗c血清,第3管加抗D血清,第4管加抗E血清,第5管加抗e血清各1滴。
⑸第1排各管加待检者红细胞悬液各1滴,第2排加阳性对照红细胞,第3排加阴性对照红细胞。
⑹每排各管加1%菠萝酶液1滴。
⑺混匀,置入37℃水浴箱中1h观察结果,若无凝集,应查找原因。
结果判读
⑴倾斜试管肉眼观察,先看阳性对照管应凝集,阴性对照管不凝集,再看待检者的试管有凝集者为阳性,无凝集者为阴性。如肉眼观察有疑问者再做镜检。
⑵分别记录,阳性或阴性。
⑶抗RhD阴性者,应作间接抗人球蛋白试验,以免遗漏Du型。附注:凡检查出体内有Rh抗体者,应发给Rh血型卡。需要时,一方面动员捐出血液,另—方面须提高警惕,以免接受不相合的血液而发生意外。
二、盐水介质法
⑴试管法
①取小试管3支,1支注明抗D,另1支注明阳性对照,最后1支注明阴性对照;
②将室温盐水反应活性的抗D血清各1滴加入上述试管内;
③抗D试管中加入1滴5%待检者红细胞(盐水、血清)悬液,阳性对照及阴性对照试管中分别加入相应的阳性红细胞及阴性红细胞悬液1滴;
④轻轻混匀,于3000r/min离心15s;
⑤取出轻轻摆动观察有无凝集。
结果判读:抗D试管中出现凝集,而阴性对照试管不凝集,阳性对照试管凝集,待检者为阳性;抗D管和阴性对照管均不凝集,阳性对照试管凝集,待检者为阴性。
⑵平板法
①取洁净平板1块,用记号笔划出反应小格,在左侧注明抗D,中间段注明阴性对照,右侧注明阳性对照;
②将室温盐水反应的抗D血清各1滴加入上述小格内;
③抗D小格内加入待检者5%红细胞悬液1滴,阳性对照小格内加入阳性对照红细胞悬液1滴,阴性对照小格加入阴性对照红细胞悬液1滴;
④用干净玻棒搅拌红细胞悬液和试剂血清充分混合;
⑤连续轻轻倾斜转动平板,一般在2min内观察结果,或按试剂说明书规定的时间观察结果。
Rh阴性血型是Rh血型系统的一种。人们大多知道血型有四种类型,即A型、B型、O型、AB型,它们都属于ABO血型系统。其实,血型不止这四种,而是有数十种类型或系统,庞大复杂。由于A型、B型、O型、AB型以外的血型抗原性大都不强,所以临床医学家认为,除上述四种血型外,再加上Rh血型系统是临床上应用最广也最为重要的血型。
在中国人群中,苗族是Rh-阴性血比例最多的民族,达百分之十三,新疆维吾尔等少数民族Rh(-)的分布为百分之五;蒙古族人百分之一;汉族人所占的比例极少,仅占千分之三,属稀有血型,如果同时考虑ABO和Rh血型系统,在汉族人群中寻找AB型Rh(-)同型人的机会不到万分之三,十分罕见。
Rh(-)是隐性基因。当Rh(+)的父母将有Rh(-)基因同时遗传给子代,其子一代即表现为Rh(-),双亲有一人是Rh(-)时,其子女为Rh(-)的机会增大,反之机会减少。
无论是Rh(-)者还是Rh(+)者其差别仅仅是血型的不同,都属健康人群。但Rh(-)者遇到特殊时其临床意义不容忽视,如连续两胎母婴Rh血型不合的妊娠,很可能导致胎儿的严重伤害;又如有输血、人流等免疫史的病人再次输入Rh(+)血时,可能产生强烈的溶血性输血反应。
血型是根据红细胞膜结构上含糖蛋白的血型抗原不同而测定出来的。不一样的血型是不能随便相互输血的。举例来说,B型血的人的红细胞中除有B抗原外,还含有抗A型血的A抗体,它能与具有A型血抗原的红细胞起免疫凝集反应。若误将A型供血者的血输给B型受血者,A型红细胞上的A抗原就会与B型受血者的A抗体起免疫反应,使A型血红细胞发生凝集而引起溶血反应,这是十分危险的。为了避免免疫和溶血反应,供血者和受血者血型要相同。
在我国,99%以上Rh血型者属阳性,所以,输血时因Rh血型不合而发生溶血反应的情况较少见。但是较少见不等于没有。如果Rh阴性血型的受血者输了Rh阳性血型的血液,就会引起免疫溶血反应。正确的做法应该是受血者和供血者的血型要一样,即都是Rh阴性血型。
Rh 阴性血型与A、B、O、AB血型不同,后者血型的人群分布较为平均,几种血型的血源都容易寻找到。而Rh阴性血型是一种稀有血型,仅占Rh血型者的不到 1%。据了解,在某市参加献血的300万人中,属于Rh阴性血型者仅有3300人。而临床手术患者中出现Rh阴性的几率是5~7/1000。相比之下,Rh阴性血型的血液就十分珍贵了。
但是,少数民族有RH阴性血的人较多。
一、Rh阴性血的危险
1、Rh阴性女和Rh阳性男结婚,那胎儿可能就是Rh阳性。那胎儿就有可能会有溶血现象。或者第二胎就会有溶血现象发生。这个现象就叫Rh溶血症,是新生儿溶血症。简单的说就是血型不融合导致。
2、Rh阳性者可以接受Rh阴性者的血液,但Rh阴性者不能接受Rh阳性者血液。第一次接受Rh阳性血液,在3月后会产生抗Rh凝聚素,如果再次输入Rh血液,就会导致溶血性输血反应。
3、溶血性输血反应:输血后红细胞受到红细胞受到破坏引起的一系列反应,可以分为急性溶血性输血反应和迟发性溶血性输血反应两类。会有发热、贫血、黄疸等症状。
Rh阴性的人怀孕的胎儿为Rh阳性,严重的会导致胎儿贫血,甚至死亡。
二、输血注意事项:
(一)在紧急输血时,Rh阴性的病人可以输给同样A、B、O、Rh阳性血液做为应急之用。在这种情形之下,病人可对RhD产生致敏感性,但是立即的溶血性反应的危险性是非常少的。
(二)若Rh阴性受血者没有相同血型的血可用,O型Rh阴性的红血球是可以的选择。
(三)Rh阴性的血浆只要与受血者的红血球合血试验相合,可任意给Rh阳性的病人输用。
(四)Rh抗原亦不存在血小板表面,输血小板时可取用含红血球在0.4毫升以下的制品输给Rh阴性的病人。
(五)Rh阴性母亲的Rh阳性新生儿黄疸需要换血时,亦可使用Rh阳性的血球替代(其在母体吸收到的抗D抗体,在换血过程中会被移走大部分,因而不致造成进一步的影响)。
(六)每个病人在输血前都会做抗体筛检试验,有抗D抗体出现者(三十万分之一),最好是输Rh阴性的血球,但在紧急情况下,亦可输Rh阳性血。